Neue beschriebene Methode für die Quantifizierung von antisense-Oligonukleotiden in Kernen

Eine neuartige Methode verwendet subzelluläre Fraktionierung zur Quantifizierung label-free-antisense-Oligonukleotide (AONs)- entwickelt, um Stille Gene gezielt zu—, die überquert haben, in den Kern einer Zelle, wo Sie können üben Ihre Wirkung. Forscher verwendeten diese Methode zur Korrelation von nuklearen Eintrag von mehreren AON-Moleküle mit der target-gen-knockdown und berichten Sie Ihre Ergebnisse in Nucleic Acid Therapeutics.

Troels Koch und Kollegen von Roche Innovation Center Copenhagen, Hørsholm, Dänemark Co-Autor den Artikel mit dem Titel „die Nukleare und Zytoplasmatische Quantifizierung der Unkonjugierten, Label-Free Gesperrt, Nukleinsäure-Oligonukleotide.“ Ihre Methode kombiniert die drei wichtigsten Techniken: subzelluläre Fraktionierung; Kern zählen; und Locked Nucleic Acid (LNA) – sandwich-Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) zur Bestimmung der absoluten Zahl der AONs in Kernen. Diese unkonjugierten LNA-Oligonukleotiden keine Etiketten, die verändern könnten, Ihre Verteilung in der Zelle. Die Forscher zeigten, dass eine erhöhte nukleare Eintrag wurde proportional erhöht zielgen knockdown, aber abhängig von der Verbindung und dem target, und andere Faktoren können Auswirkungen auf die Ziel-Transkript-level-Reduktion.